單組份酶底物顯色液技術配方
酶底物即TMB,用于ELISA反應。底物產生一種可溶性淡藍色的末端產物,可在370或635nm在分光光度計上讀取。其適用于酶聯免疫反應中的顯色階段的定量和定性分析。其檢驗的原理是:當標記在抗體或抗原上的酶與顯色液中的酶底物、雙氧水等反應,加入終止液后溶液由無色變成黃色,黃色深淺反應ELISA體系中抗原抗體結合的多少,從而判斷某種抗原或抗體的多少。在通過酶標儀測度吸光值,判斷免疫反應的程度。現有市售的酶聯免疫試劑盒所采用酶底物顯色劑液大多為雙組份,分A液和B液,使用之前需要先混勻,在使用上存在缺點一是不夠方便,二是在包裝材料上存在成本提高和資源浪費;三是使用中的混合過程容易造成批間質量不均一;四是還存在穩定性差、保存時間短、顯色背景高、靈敏度低等的缺點。
華炬新產品研究所技術咨詢委員會科研人員現推薦一項單組份酶底物顯色液技術配方,該技術產品克服現有顯色液操作麻煩、靈敏度低的問題;該技術產品用過硼酸鈉替代現有的過氧化氫、過氧化脲,與過氧化氫、過氧化脲相比,過硼酸鈉具有更好的氧化性,過硼酸鈉提高了單組份酶底物顯色液的顯色效果;通過將該技術所述范圍內的單組份酶底物顯色液用于酶聯免疫反應中的顯色階段,避免了酶底物顯色液在使用之間需要將A、B液混合的操作步驟,簡化操作流程,減少了操作時間,提高了效率,同時避免了因A、B液不同批次間的差異導致混合的顯色劑的顯色效果;通過將該技術所述范圍內的單組份酶底物顯色液用于酶聯免疫反應中的顯色階段,避免了酶底物顯色液的有效顯色成分的濃度發生改變,進而提高了酶底物顯色液的靈敏度,現將該單組份酶底物顯色液技術配方實例介紹如下供研究交流參考:(511541 221445)
